液相色譜儀-使用注意事項(xiàng)
發(fā)布者：汕頭市科毅儀器設(shè)備有限公司
關(guān)鍵字 ：液相色譜儀
1 專門的純水機(jī)或超純水機(jī)；
2 去離子水重蒸；
3 二次或三次重蒸水；
4 采用類似家用的純水機(jī)；
5 市場(chǎng)上瓶裝的純凈水或蒸餾水；
6 其它途徑
以上的水除第1項(xiàng)的水能用于梯度淋洗外，其余的水均難用于梯度淋洗。不管采用何種途徑，配制流動(dòng)相應(yīng)用新鮮水，水質(zhì)越高放置時(shí)間越短。
理想的HPLC用水應(yīng)為18.2MΩ的超純水，并通過(guò)0.22um的濾膜，除去熱源、有機(jī)物、無(wú)機(jī)離子及空氣等。
最小檢測(cè)限的計(jì)算方法
（以N2000色譜工作站為例）
CL=2＊Nd＊c＊20/HV
注：Nd 基線噪聲，單位：mV
c 樣品濃度
H 峰高，單位：mV（或AU）
V 進(jìn)樣體積
例：
如基線噪聲為20微伏即0.02mV，萘的甲醇標(biāo)樣溶液濃度為0.0001g/L，峰高145000微伏即145mV，進(jìn)樣體積為20微升，即得：
CL=2＊0.02＊0.0001＊20/145＊20=2.76e-8
即10的負(fù)8次方
對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)時(shí)應(yīng)該遵循的幾條基本規(guī)則
1. 一次規(guī)則
當(dāng)系統(tǒng)出了故障，你可以試探性地改變某些狀態(tài)，一次可以改變一個(gè)參數(shù)。例如，限制色譜峰脫維的問(wèn)題，可以依次改變流動(dòng)相，換保護(hù)柱，換分析柱等。做一些簡(jiǎn)單的改變步驟，也許就能解決問(wèn)題。
2. 二次比較規(guī)則
在動(dòng)手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在，或者已經(jīng)確定了解決故障的方案。換句話說(shuō)，動(dòng)手之前已經(jīng)找對(duì)了解決辦法。例如，在進(jìn)樣過(guò)程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)標(biāo)物的峰值變低了，可以重復(fù)進(jìn)樣看看重復(fù)性如何，如果是偶然變低，是否是定量管里進(jìn)了氣泡。這個(gè)規(guī)則可用于考察系統(tǒng)改變后的情況。更換了流動(dòng)向后在正式進(jìn)樣前可以進(jìn)兩次標(biāo)準(zhǔn)品以檢查保留時(shí)間的穩(wěn)定情況和色譜峰的穩(wěn)定性。在梯度洗脫中如果出現(xiàn)了多余的峰，可以空載梯度洗脫一次（真的有問(wèn)題嗎？），用此規(guī)則可以避免不必要的改變，盡快確定糾正措施。
3. 取代規(guī)則
用好的部件換下可疑的部件，是查找故障的最好方法。如果你懷疑檢測(cè)器引起了噪音，就換一個(gè)性能好的檢測(cè)器。如果故障被排除了，就說(shuō)明換下的檢測(cè)器有問(wèn)題。這個(gè)規(guī)則應(yīng)用的規(guī)模有大有小，可以從換整個(gè)部件到換印刷線路板上的集成塊。
4. 換回規(guī)則
這個(gè)規(guī)則和取代規(guī)則一起運(yùn)用，好部件取代了可疑部件后情況并未得到改善，應(yīng)重新?lián)Q上原部件。這樣做的維修費(fèi)用最小，也防止了用過(guò)的部件積壓下來(lái)。這條規(guī)則僅適用于單一的故障。換回原則不適用于以下的情況：
（1） 在取下時(shí)新部件已損壞（如泵密封墊圈）；
（2） 部件價(jià)格低（如柱內(nèi)襯過(guò)濾片）；
（3） 重新裝上原部件要冒損壞的風(fēng)險(xiǎn)；
（4） 定期更換的部件。
5. 參考條件規(guī)則
通常有兩種參考條件：①標(biāo)準(zhǔn)參考條件；②試驗(yàn)參考條件。
標(biāo)準(zhǔn)參考條件也叫標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)條件，是從一個(gè)系統(tǒng)到另一個(gè)系統(tǒng)，從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室都易于驗(yàn)證的條件。用該條件所測(cè)得的數(shù)據(jù)有助于識(shí)別實(shí)際試驗(yàn)和系統(tǒng)間的問(wèn)題。如果在某試驗(yàn)條件下系統(tǒng)壓力升高，而在標(biāo)準(zhǔn)條件下壓力正常。這說(shuō)明系統(tǒng)異常是由實(shí)驗(yàn)室的變化所引起的。下表列舉了啟用新色譜柱是的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)條件，在使用過(guò)程中也可用此標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)條件檢查系統(tǒng)的情況。
流動(dòng)相 甲醇/水（體積比=70/30）
色譜柱 C18
反相 流速 1mL/min
檢測(cè)器 UV 254nm
樣品 尿嘧啶（用于t0）
苯酚，苯乙酮，硝基苯，苯甲醚，甲苯
流動(dòng)相 正己烷/異丙醇（體積比=75/25）
色譜柱 腈基
極性鍵合相 流速 1mL/min
檢測(cè)器 UV 254nm
樣品 硝基苯，芐醇，2,4-二硝基甲苯，對(duì)硝基芐醇
流動(dòng)相 正己烷/二氯甲烷/異丙醇胺（體積比=95/4/1）
色譜柱 硅膠
正相 流速 1mL/min
檢測(cè)器 UV 254nm
樣品 2-苯-2-丙醇，甲芐醇，肉桂醇
試驗(yàn)參考條件是用于檢查正常系統(tǒng)每天的工作情況。要選最方便的方法驗(yàn)證這種條件。每天可以打印兩張校正用色譜圖作對(duì)照，檢查保留時(shí)間、峰寬、系統(tǒng)壓力等方面的變化。發(fā)現(xiàn)峰的斜率、色譜柱塔板數(shù)和其他參數(shù)與原來(lái)色譜圖相比有了變化，說(shuō)明系統(tǒng)在運(yùn)行中可能發(fā)生了問(wèn)題。當(dāng)然發(fā)生問(wèn)題不結(jié)合實(shí)際分析程序考慮，只通過(guò)查找標(biāo)準(zhǔn)參考色譜圖是不能一目了然的。
6. 記錄規(guī)則
這條規(guī)則往往被人忽視。應(yīng)該在每次維護(hù)和故障排除后都作記錄。例如，對(duì)系統(tǒng)的某一特定故障因?yàn)闆](méi)作記錄就不可能系統(tǒng)地分析問(wèn)題，費(fèi)時(shí)又費(fèi)力。從長(zhǎng)遠(yuǎn)掛點(diǎn)看，系統(tǒng)發(fā)生的特定故障對(duì)今后的操作也有極其重要的意義。每臺(tái)儀器都應(yīng)備有維修記錄本，內(nèi)容包括日期、故障部位、現(xiàn)象、產(chǎn)生的原因、解決的辦法和結(jié)果等。還有一點(diǎn)要注意，試過(guò)或換下的部件都要貼上標(biāo)志。
做好維修保養(yǎng)記錄有如下好處：
（1） 讓所有的操作人員都知道發(fā)生了什么故障，在操作過(guò)程中以引起注意；
（2） 幫助操作人員描述故障現(xiàn)象；
（3） 當(dāng)再次發(fā)生故障時(shí)可根據(jù)資料盡快解決問(wèn)題。
7. 預(yù)測(cè)規(guī)則
有維修實(shí)踐和保養(yǎng)習(xí)慣的人員應(yīng)能夠預(yù)測(cè)系統(tǒng)的故障，平時(shí)在保養(yǎng)方面多投入些時(shí)間，系統(tǒng)會(huì)以減少故障作為報(bào)答，同時(shí)也消除了連鎖性的損壞。例如，平時(shí)不注意保養(yǎng)，泵的密封墊圈壞了，造成流動(dòng)相滲漏，會(huì)腐蝕泵和其它部件。善于保養(yǎng)能節(jié)約時(shí)間和金錢，而不是儀器控制了操作人員。例如，每天開(kāi)始工作或結(jié)束工作時(shí)發(fā)現(xiàn)燈壽命引起基線漂移就把燈換下來(lái)。如果等到燈全壞了，就需要停機(jī)，造成的損失可能比一個(gè)燈的費(fèi)用還要高。
8. 緩沖液規(guī)則
這條規(guī)則提醒你停機(jī)時(shí)一定要洗凈系統(tǒng)中的緩沖物。系統(tǒng)中的緩沖物的殘余會(huì)造成磨損、腐蝕和阻塞。另外，生理緩沖液極易受到細(xì)菌和霉菌的影響。理想的沖洗液是不含緩沖物的相同組成的流動(dòng)相。不要讓純水儲(chǔ)藏于系統(tǒng)中，以防生長(zhǎng)細(xì)菌？稍谒屑尤10%的有機(jī)溶劑或0.02~0.05%的疊氮化鈉。在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)按如下程序沖洗：用純水沖洗30~60min1mL/min再用甲醇沖洗30min后關(guān)機(jī)。千萬(wàn)不能一開(kāi)機(jī)就用有機(jī)溶劑沖洗，否則無(wú)機(jī)鹽就`會(huì)沉淀在系統(tǒng)中，造成不良后果。
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